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淋巴细胞亚群

机体免疫状态是衡量机体是否患病的重要指标,目前多采用流式细胞术来监测机体的免疫状态,其中最重要的指标是检测T、B和NK淋巴细胞的水平。

T细胞主要包括T辅助细胞(Th)和T抑制细胞(Ts)细胞亚群。CD3+细胞代表外周血中总的成熟T细胞,理论上应约等于CD4+细胞和CD8+细胞的总和,但往往出现CD4+加CD8+细胞之和大于CD3+,这是因为CD4+细胞包括CD3+/CD4+细胞(真正Th细胞)和CD3-CD4+细胞(非Ts细胞),而后者包括CD3-CD8+CD16+56+细胞(一部分NK细胞)和CD3-CD8+CD16+56-(未知细胞)。由此可见,真正的TH细胞是CD3+CD4+细胞,真正Ts细胞是CD3+CD8+细胞。尤其当患者NK细胞明显增加时,会使CD4细胞和CD8细胞的总和远大于CD3+细胞,因此,用三色荧光标记才能分析真正的辅助性T细胞和抑制性T细胞。
首先在淋巴细胞中识别出CD3细胞,然后在CD3细胞中再区分CD4+和CD8+细胞。NK细胞的表面无T细胞和B细胞表面标志,但有CD16和CD56等标志,用CD16+56抗体能鉴定出NK细胞(一定是CD3阴性),CD3-CD16+56+细胞才是真正的NK细胞。根据是否表达CD8,又可将NK细胞分为CD3-CD8+CD16+56+细胞(所占比例小,不影响CD8比例)和CD3-CD8-CD16+56+细胞(主要成分)。

B细胞的表面标志是CD19,理论上CD3-CD19+细胞才是真正的B淋巴细胞。但CD3+CD19+细胞很少,可忽略不计,所以CD19+细胞就是B淋巴细胞。

在抗肿瘤效应中,CD4和CD8分别是T淋巴细胞的辅助/诱导细胞亚群与抑制/细胞毒细胞亚群,CD4细胞的主要功能是通过其分泌的淋巴因子,增强和扩大免疫应答过程,辅助诱导其它免疫细胞如杀伤性T细胞,B细胞等共同发挥抗肿瘤作用,CD4细胞的减少,导致免疫功能低下。CD4/CD8比值是重要的免疫状态监测指标,其比例的降低与免疫系统损害的程度相关。

CD4降低见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷症、艾滋病、应用免疫抑制剂者;CD8降低见于自身免疫性疾病或变态反应性疾病;CD4/CD8比值升高见于恶性肿瘤、自身免疫性疾病、变态反应、病毒感染等;CD4/CD8比值降低见于艾滋病(常小于0.5)。监测器官移植排斥反应时,CD4/CD8比值升高预示可能发生排斥反应。

淋巴细胞担负着免疫的主要功能。淋巴细胞亚群的测定有助于了解机体免疫状况及一些疾病的监测。利用各种单克隆抗体与淋巴细胞表面的抗原结合,再配合多色荧光染料,通过流式细胞仪检测分析即可以把各种不同功能的淋巴亚群区分开来,进而得到各亚群的相对比例。最常检测的亚群包括T细胞(CD3)、B细胞(CD19)、NK细胞(CD16+56)、辅助性T细胞(CD3+CD4+)和抑制性T细胞(CD3+CD8+)等等。


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